医学生物学技术与原理

当今世界，科学技术的发展日新月异。生物科学是新世纪科学发展的前沿领域之一，同时也进入了空前繁荣的时期，21世纪将是生物科学的世纪。
由于人体结构和机能的复杂性，许多疾病的病因和发病机制至今尚不十分明了，在预防和治疗方面也缺乏行之有效的措施。随着分子生物学和基因工程等高新技术的发展，以及膜片钳、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等先进仪器的出现，给医学生物学研究插上了腾飞的翅膀。相信在不远的将来，许多严重危害人类健康的重大疾病有望得到征服。
青岛大学医学院脑血管病研究所长期从事神经病学的基础和临床研究，在医学生物学实验技术方面积累了较为丰富的技术资料和工作经验。特别是2001年山东省脑病防治重点实验室对外开放以来，越来越多的研究生和科研工作者申请来本实验室开展工作。为了使广大来实验室工作的研究人员能够迅速了解本实验室的基本情况，掌握有关实验技术和方法，顺利完成科研工作，我们组织有关人员，参考国内外有关资料，编写了《医学生物学实验技术》讲义，供有关研究人员参考使用。我们本着理论联系实际、边实践边修改的原则，经过近几年的试用、反复修订，最后成书，作为我校研究生的试用教材。
本书首先简要介绍了常用的经典医学实验技术、医学动物实验技术和细胞培养技术，然后分别介绍了免疫组织化学技术、分子杂交技术、聚合酶链反应技术、基因重组和基因治疗技术、干细胞技术、显微切割技术，以及电子显微镜技术、激光扫描共聚焦显微镜技术、流式细胞技术、膜片钳技术、高效液相色谱技术等。本书内容由浅入深、注重实践、实用性强，可满足医学生物学等相关专业研究生开展科研工作的需要，也可供相关专业研究人员参考使用。

第一章 经典实验技术
第一节 解剖学技术
迄今为止，解剖学研究早已超出了以大体形态为中心的范畴，但解剖学技术直接关系到所提供的标本和资料的系统性、完整性和可靠性。因此，必须重视有关解剖学技术。
一、大体解剖学技术
1.标本收集：大体标本主要来自尸体和手术采集的活体组织标本。
2.取材：标本越新鲜越好，要尽可能除去多余的组织。标本切面要保持平整，及时放人固定液或冷冻保存。不要将标本长时间暴露在空气中，以防水分丢失。
（1）实质性器官：固定液不易穿透实质性器官（如肝、脾等），通常用锋利的长刀沿器官长轴均匀地切成若干片（1～2cm），将欲显示的切面朝上，平整地放于固定液中保存。若要保留整个脏器，需经血管灌注后，再放人盛有固定液的容器中保存。
（2）中空性器官：先把中空性器官（如胃、肠等）浆膜面的多余脂肪剪掉，然后将器官剪开使黏膜面向上，按其自然形状用大头针沿周边固定于木板上，将黏膜面向下悬浮于固定液中，6h后去掉大头针，以防生锈。为保持器官的原形，可填充适量脱脂棉后再固定。
（3）骨组织标本：如只观察整骨的结构，可将骨的周围组织去除，锯一整齐的剖面进行固定。对骨肿瘤标本要注意，由于骨组织坚硬，肿瘤组织较致密，固定时间要适当延长，一般2～3周，体积较大的骨肿瘤标本，要固定4～5周。
3.固定：甲醛（formaldehyde）是甲醛气饱和于水中的甲醛溶液。大体标本通常用10％的甲醛溶液（福尔马林）固定。甲醛固定液渗透力强、固定均匀、对组织收缩性小，主要起防腐和硬化作用，简便可靠，可以对标本进行长期保存。但甲醛对血色素有破坏作用，故经甲醛固定的标本失去了原有的颜色。
……