生物化学实验指导

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本书是在使用多年的实验讲义的基础上编写的，根据我们多年的教学、科研经验和兄弟院校的建议，对内容进行了必要的调整和修改，并补充了许多新的实验内容。在编写过程中力求做到简明、扼要、实用性强。
全书分为5章，精选了28个实验，除了生物化学的基础性实验外，还增加了有关酶分离纯化的综合性实验及基本的分子生物学实验。在附录中，主要介绍了实验室的安全防护知识、常用试剂和溶液的配制、常规仪器使用说明及常用数据列表等内容。
本书适合高等院校相关学科的本科生和研究生使用。

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第一章 蛋白质
　　实验一 氨基酸的纸层析法
　　一、目的
色层分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类等物质的分离与分析。其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质，并且设备简单、操作容易、样品用量少、结果也较准确。
本实验的目的在于掌握纸层析法的一般原理和操作技术。
　　二、原理
纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。分配层析法利用物质在两种互不相溶的溶剂中分配系数的不同达到分离的目的。通常用。表示分配系数。在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。
　　a=溶质在流动相的浓度（CL）/溶质在静止相的浓度（Cs）
本实验的层析溶剂由有机溶剂和水组成。由于滤纸纤维与水有较强的亲和力（纸上有很多-OH基与水以氢键相连），吸附很多水分，一般达滤纸重的22％左右（其中约有6％的水与纤维素结合成复合物），因此使这部分水的扩散作用降低形成静止相。而滤纸对有机溶剂的亲和力较弱，有机溶剂可以在滤纸中因毛细管作用自由流动，因此便形成了流动相。层析时，将滤纸一端浸入层析溶液中。有机溶剂连续不断地通过点有样品的原点处，其中的溶质因为本身分配系数的不同在两相间进行分配。分配过程为：一部分溶质随有机相移动离开原点而进入无溶质区，并重新分配，即一部分溶质从有机相又进入水相。随着有机相不断向前移动，溶质不断地在两相间进行可逆的分配，不断向前移动。各种物质在分配层析系统中两相间的分配系数不同，分配系数小的溶质在流动相中分配的数量少，移动的速率慢，所以各种溶质在层析过程中由于移动的速率不同便可以彼此分开。
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