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内容简介

本书着重介绍基因工程的基础知识、基本原理和技术。在工具酶和克隆载体的基础上，以原核生物基因克隆和表达作为主体，系统介绍外源基因片段的获得、体外重组、导入技术、阳性克隆的筛选与鉴定、克隆基因的高效表达以及获取目的基因的多种途径。第7和第8章是主体内容的延伸，有利于教师为学生拓展更为生动的基因工程知识。全书力求简明扼要、深入浅出、图文并茂，突出了实用性和通用性。
本书适用于大专院校生命科学领域本科生、研究生的教材，也可作为其他相关专业课程的参考书。

目　　录

绪论
0.1 　基因工程的诞生及其发展史
0 .1 .1 　基因工程产生的基础
0 .1 .2 　基因工程的诞生
0 .1 .3 　基因工程的快速发展
0.2 　基因工程的研究内容及其应用
0 .2 .1 　基因工程的研究内容
0 .2 .2 　基因工程的应用
0.3 　基因工程的安全性
0 .3 .1 　基因工程早期的安全性争论
0 .3 .2 　基因工程的安全性问题
0 ．3 ．3 　基因工程技术应用的安全管理
思考题
推荐参考书

绪论 0.1 　基因工程的诞生及其发展史 0 .1 .1 　基因工程产生的基础 0 .1 .2 　基因工程的诞生 0 .1 .3 　基因工程的快速发展 0.2 　基因工程的研究内容及其应用 0 .2 .1 　基因工程的研究内容 0 .2 .2 　基因工程的应用 0.3 　基因工程的安全性 0 .3 .1 　基因工程早期的安全性争论 0 .3 .2 　基因工程的安全性问题 0 ．3 ．3 　基因工程技术应用的安全管理 思考题 推荐参考书 附基因工程安全管理办法 第1章基因工程的基础知识与基本技术 1.1 　基因工程的基础知识 1 .1 .1 　基因的结构特点 1 .1 .2 　从DNA 到蛋白质 1 .1 .3 　基因研究进展 1.2 　基因工程的基本技术 1 .2 .1 　电泳技术 1 .2 .2 　PCR 技术 1 .2 .3 　分子杂交 1 .2 .4 　DNA 序列分析 1 .2 .5 　基因突变技术 思考题 推荐参考书 第2章基因操作的工具酶 2.1 　限制性核酸内切酶 2 .1 .1 　寄主控制的限制与修饰作用 2 .1 .2 　限制性核酸内切酶的分类与命名 2 .1 .3 　Ⅱ 型限制酶的特性与DNA 的切割 2 .1 .4 　影响限制性核酸内切酶活性的因素 2.2 　DNA 连接酶类 2 .2 .1 　DNA 连接酶 2 .2 .2 　连接酶对DNA 分子的连接作用 2 .2 .3 　影响连接反应的因素 2.3 　DNA 聚合酶类 2 .3 .1 　大肠埃细菌DNA 聚合酶Ⅰ 2 .3 .2 　Klenow 聚合酶 2 .3 .3 　T4DNA 聚合酶 2 .3 .4 　T7DNA 聚合酶 2 .3 .5 　Taq DNA 聚合酶 2 .3 .6 　逆转录酶 2.4 　修饰酶类 2 .4 .1 　S1 核酸酶 2 .4 .2 　碱性磷酸酶 2 .4 .3 　T4 多核苷酸激酶 2 .4 .4 　末端脱氧核苷酸转移酶 思考题 推荐参考书 第3章基因克隆的载体 3.1 　质粒载体 3 .1 .1 　质粒的生物学特性 3 .1 .2 　理想质粒载体构建的基本原理和方法 3 .1 .3 　大肠埃细菌的几种克隆载体的构建 3.2 　噬菌体载体 3 .2 .1 　噬菌体的生物学特性 3 .2 .2 　λ 噬菌体载体的构建 3 .2 .3 　λ 噬菌体载体的类型 3.3 　柯斯质粒载体 3 .3 .1 　柯斯质粒载体的组成 3 .3 .2 　柯斯质粒载体的特性 3 .3 .3 　使用柯斯质粒克隆载体的基本程序 3.4 　单链DNA噬菌体(M13噬菌体)克隆载体 3 .4 .1 　M13 噬菌体的生物学特性 3 .4 .2 　构建M13 噬菌体克隆载体的策略和途径 3 .4 .3 　M13 克隆载体的应用 3.5 　噬菌粒载体 3 .5 .1 　噬菌粒载体的概念 3 .5 .2 　pUC118 和pUC119 噬菌粒载体 3.6 　人工染色体克隆载体 3 .6 .1 　人工染色体克隆载体的含义和特点 3 .6 .2 　酵母人工染色体克隆载体的构建 3 .6 .3 　细菌人工染色体的构建 3 .6 .4 　哺乳动物人工染色体 3 .6 .5 　人工染色体克隆载体的应用 思考题 推荐参考书 第4章DNA分子克隆 4.1 　基因克隆方案 4 .1 .1 　含目的基因的DNA 片段获得 4 .1 .2 　载体与目的DNA 片段的体外重组 4 .1 .3 　重组DNA 分子导入宿主细胞 4 .1 .4 　重组子的筛选 4.2 　重组体的构建 4 .2 .1 　黏末端连接 4 .2 .2 　平末端连接 4 .2 .3 　修饰黏末端连接 4 .2 .4 　连接条件的优化 4 .2 .5 　重组体构建的修饰 4.3 　重组体导入宿主细胞 4 .3 .1 　重组DNA 分子的转化或转染 4 .3 .2 　重组体的体外包装及λ 噬菌体的转导 4 .3 .3 　直接转化技术 4.4 　重组体克隆的筛选与鉴定 4 .4 .1 　表型特征筛选(遗传检测法) 4 .4 .2 　菌落(噬菌斑)原位杂交筛选 4 .4 .3 　免疫学方法筛选 4 .4 .4 　结构分析筛选 4 .4 .5 　转译筛选 思考题 推荐参考书 第5章目的基因的获取 5.1 　化学合成法获得目的基因 5 .1 .1 　亚磷酸三酯法 5 .1 .2 　基因的组装 5.2 　PCR 技术获取目的基因 5 .2 .1 　反转录PCR 5 .2 .2 　依据基因部分序列信息获得基因全长序列 5.3 　筛选基因文库获取目的基因 5 .3 .1 　基因文库的构建 5 .3 .2 　cDNA 文库的构建 5 .3 .3 　筛选基因文库获取目的基因 5.4 　转座子标签法获得目的基因 5 .4 .1 　转座子标签法的基本原理 5 .4 .2 　转座子标签法的应用 5.5 　图位克隆获得目的基因 5 .5 .1 　染色体步移 5 .5 .2 　染色体登陆 5.6 　mRNA差别显示技术获得差异表达的基因 5 .6 .1 　mRNA 差别显示技术原理 5 .6 .2 　mRNA 差别显示技术的应用分析 5.7 　酵母双杂交系统分离目的基因 5 .7 .1 　酵母双杂交技术的基本原理 5 .7 .2 　酵母双杂交系统的组成成分 5 .7 .3 　酵母双杂交技术的实验程序 5.8 　生物信息技术分离和鉴定目的基因 5 .8 .1 　利用EST 数据库发现新基因 5 .8 .2 　通过蛋白家族的保守性分离目的基因 5.9 　获取目的基因方法的选择策略 思考题 推荐参考书 第6章克隆基因的表达 6.1 　克隆基因表达的基本规律 6 .1 .1 　克隆基因表达的过程 6 .1 .2 　克隆基因表达的调控元件 6.2 　克隆基因的表达系统 6 .2 .1 　大肠埃细菌表达系统 6 .2 .2 　酵母表达系统 6.3 　克隆基因高效表达的策略 6.3.1 　影响克隆基因表达的因素 6.3.2 　大肠埃细菌高效表达外源基因的策略 6.3.3 　克隆基因表达产物的利用 思考题 推荐参考书 第7章基因工程相关技术 7.1 　基因信息分析技术 7 .1 .1 　核酸序列的检索 7 .1 .2 　核酸序列的基本分析 7 .1 .3 　基因的电子表达谱分析 7 .1 .4 　核酸序列的电子基因定位分析 7 .1 .5 　基于核酸序列比对分析的功能预测 7 .1 .6 　cDNA 序列的开放读码框分析 7 .1 .7 　引物设计 7.2 　基因芯片技术 7 .2 .1 　基因芯片的技术原理 7 .2 .2 　基因芯片的制备 7 .2 .3 　靶序列的标记和杂交 7 .2 .4 　基因芯片的应用 思考题 推荐参考书 第8章转基因生物技术简介 8.1 　转基因植物技术 8 .1 .1 　植物基因转化系统 8 .1 .2 　转基因植物的筛选与检测 8 .1 .3 　植物基因工程表达载体的改进和优化 8 .1 .4 　植物基因工程应用 8.2 　转基因动物技术 8 .2 .1 　培育转基因动物的基本操作过程 8 .2 .2 　外源基因导入动物细胞的方法 8 .2 .3 　转基因动物的研究成果及应用 8.3 　杆状病毒与昆虫细胞表达系统 8 .3 .1 　杆状病毒的分子生物学特性 8 .3 .2 　杆状病毒表达系统的优点 8 .3 .3 　杆状病毒载体 8 .3 .4 　昆虫培养细胞表达系统在外源蛋白生产上的应用 8 .3 .5 　利用虫体生产重组蛋白 8.4 　蓝藻基因工程 8 .4 .1 　蓝藻基因工程的概况 8 .4 .2 　蓝藻基因工程的载体构建 8 .4 .3 　蓝藻遗传转化 8 .4 .4 　用作外源基因表达的宿主蓝藻 8 .4 .5 　基因筛选与检测 8 .4 .6 　蓝藻基因工程的应用 思考题 推荐参考书 参考文献 英文专业名词索引

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