酶学实验手册

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本书介绍了酶学中的实验方法。内容涉及酶反应、酶测定的基本理论、酶的实验室操作、酶的技术应用和测定仪器等实用性很强的内
容，是一本可操作性很强的实验室酶学手册。在内容编排上体现了下列特色：
　　列出了大约60种不同的酶的具体测定方法：
　　详细介绍了蛋白质结合和固定化酶的测定方法。
作者Hans Bisswanger教授一直从事于酶学领域的研究而且有着几十年的教学经验，他在总结教学实践和科学研究的基础上写成本书。本书可供生物化学、分子生物学、发育生物学、生物工程等领域的研究生和高年级本科生阅读，也可供上述领域研究人员参考。

3　酶反应
　　3.3　酶测定理论
　　3.3.1 反应曲线分析
测定酶反应实验的一个首要难点是：酶反应并不是像火车一样总是以一个恒定的速度前进，它不是遵循简单的定时过程，而是不同的阶段彼此融合。由于酶的特殊性、选择的条件以及其他因素，如不同阶段或多或少的融合，因此，除非有一个关于酶反应比较清楚的基本原则，否则对酶反应的分析将会导致错误的判断。
幸运的是，数不清的酶反应可以用一个单一的、相对简单的关系来描述，就是上面提到的米氏方程。然而米氏方程也有它的局限性，第一个局限性就是，这个方程起源于不可逆的单一底物的反应情况，但大多数的酶反应都被认为是可逆的，有两个或更多的底物，同时也包括辅助因子或辅酶。考虑所有这些因素，酶反应的关系变得复杂。然而，如此难的关系也可以通过简化归纳为米氏方程的单一形式，比如说仅限于初速度或只考虑除了可变的底物外所有组分都作为常数。然而，这种简化并不总能保证在实验条件下真正地应用。
一般来说，酶实验有两个目的：测定酶活力或者计算底物浓度。尽管为了达到这两个目的需要不同策略，但两者的实质都是了解酶反应过程。因此，首先对一个普通的酶反应进行讨论。
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